本品为蔷薇科植物山里红 Crataegus pinnatifida Bge. var. major N. E. Br. 或山楂 Crataegus pinnatifida Bge. 的干燥叶经加工制成的提取物。 【制法】取山楂叶,粉碎成粗粉,加50%乙醇提取两次(55~60°C),每次2小时,第一次加10倍量,第二次加8倍量,滤过,合并滤液,回收乙醇至滤液无醇味,用等量水稀释, 通过D101大孔吸附树脂柱,依次用水及不同浓度的乙醇洗脱,收集相应的洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度约1.10(60°C)的清膏,喷雾干燥,即得。 【性状】本品为浅棕色至黄棕色的粉末;气特异,味苦,有引湿性。 【鉴别】取本品5mg,用甲醇2ml溶解,滤过,滤液作为供试品溶液。另取牡荆素鼠李糖苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则 0502)试验,吸取上述两种溶液各2~3μl,分别点于同一硅胶 GF254薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-水(25∶5∶3)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。 【检查】干燥失重 取本品1g,精密称定,置干燥至恒重的称量瓶中,在硫酸干燥器中干燥24小时,减失重量不得过2.0%(通则0831)。 【特征图谱】照高效液相色谱法(通则0512)测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以四氢呋喃-甲醇-乙腈-乙酸-水(38∶3∶3∶4∶152) 为流动相;检测波长为330nm。理论板数按牡荆素鼠李糖苷峰计算应不低于2500。 参照物溶液的制备 取牡荆素鼠李糖苷对照品适量,精密称定,加60%乙醇制成每1ml含100μg的溶液,即得。 供试品溶液的制备 取本品50mg,精密称定,置50ml 量瓶中,加60%乙醇溶解并稀释至刻度,即得。 测定法 分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各 10μl,注入液相色谱仪,测定,记录色谱图,即得。 供试品特征图谱中应呈现4个特征峰,与参照物峰相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,应在规定值的±5%范围之内。相对保留时间规定值为:0.76(峰1)、1.00(峰 S)、l.55(峰 2)、1.94(峰 3)。 积分参数 斜率灵敏度为5,峰宽为0.04,最小峰面积为10,最小峰高为S峰峰高的1%。 【含量测定】总黄酮 对照品溶液的制备 取芦丁对照品适量,精密称定,加乙醇制成每1ml含芦丁0.20mg的溶液(必要时超声处理使溶解),即得。 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml,分别置25ml量瓶中,各加水至6ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,使混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在500nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。 测定法 取本品0.15g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇25ml,密塞,摇匀,超声处理5分钟,放置3小时以上,滤过,精密量取续滤液2ml,置25ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。精密量取供试品溶液2ml,置25ml量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加水至6ml”起,依法测定吸光度,同时精密量取供试品溶液 2ml,置25ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,作为空白溶液。从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的量,计算,即得。 本品按干燥品计算,含总黄酮以芦丁 (C27H30O16)计,不得少于80.0%。 牡荆素鼠李糖苷 照高效液相色谱法(通则0512)测定。 色谱条件与系统适用性试验 同〔特征图谱〕项下。 对照品溶液的制备 取牡荆素鼠李糖苷对照品适量,精密称定,加60%乙醇制成每1ml含100μg的溶液,即得。 供试品溶液的制备 取本品50mg,精密称定,置50ml 量瓶中,加60%乙醇溶解并稀释至刻度,即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。 本品按干燥品计算,含牡荆素鼠李糖苷(C27H30O14)不得少于8.8%。 【贮藏】密封,置阴凉干燥处。 【制剂】益心酮片 益心酮滴丸 益心酮分散片
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