本品系由健康小鼠颌下腺提取的生物活性蛋白质，经分离、纯化后加入适宜稳定剂后冻干制成。不含抑菌剂。
　　1  基本要求
　　生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
　　2  制造
　　2.1  小鼠颌下腺来源及采集
　　2.1.1  采用体重为20g以上60～90日龄健康雄性小鼠，小鼠应符合清洁级动物相关要求（通则3602与通则3603）。[1]
　　2.1.2  采用适宜方法处死小鼠，经局部消毒处理后摘取颌下腺，剔除其他组织后备用。如需存放应冻存于-20℃以下，并规定保存时间。
　　2.2  原液
　　2.2.1  提取
　　采用适宜的方法将小鼠颌下腺破碎匀浆，离心取上清。
　　2.2.2  纯化
　　采用经批准的方法进行纯化、病毒去除或灭活后即为鼠神经生长因子原液。
　　2.2.3  原液检定
　　按3.1项进行。
　　2.3  半成品
　　2.3.1  配制
　　按成品规格配制，并加入适宜稳定剂。
　　2.3.2  半成品检定
　　按3.2项进行。
　　2.4  成品
　　2.4.1  分批
　　应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定。
　　2.4.2  分装及冻干
　　应符合“生物制品分包装及贮运管理”及通则0102有关规定。
　　2.4.3  规格
　　18μg（9000U）/瓶或20μg（9000U）/瓶，30μg（15000U）/瓶。
　　2.4.4  包装
　　应符合“生物制品分包装及贮运管理”及通则0102有关规定。
　　2.5  病毒去除和灭活
　　生产过程中应釆用经批准的方法去除和灭活病毒。如用灭活剂（如有机溶剂、去污剂）灭活病毒，则应规定对人安全的灭活剂残留量限值。
　　3  检定
　　3.1  原液检定
　　3.1.1  生物学活性
　　依法测定（通则3530）。
　　3.1.2  蛋白质含量
　　依法测定（通则0731第二法），应不低于0.1mg/ml。
　　3.1.3  比活性
　　为生物学活性与蛋白质含量之比。每1mg蛋白质应不低于5.0×105AU。[2]
　　3.1.4  纯度
　　3.1.4.1  电泳法
　　依法测定（通则0541第五法）。用非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分离胶胶浓度为15%，加样量应不低于10μg（考马斯亮蓝R250染色法）。经扫描仪扫描，纯度应不低于98.0%。
　　3.1.4.2  高效液相色谱法
　　依法测定（通则0512）。色谱柱以适合分离分子质量为5～60kD蛋白质的色谱用凝胶为填充剂；流动相为0.25mol/L磷酸盐缓冲液（含0.15mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L磷酸二氢钠溶液）-乙腈（85∶15）；上样量应不低于20μg，在波长280nm处检测，以鼠神经生长因子色谱峰计算的理论板数应不低于1000。按面积归一化法计算，鼠神经生长因子主峰面积应不低于总面积的95.0%。
　　3.1.5  分子量
　　依法测定（通则0541第五法）。用还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分离胶胶浓度为15%，加样量应不低于1.0μg，供试品的分子质量应为11.0～15.0kD。
　　3.1.6  等电点
　　主区带应为8.4～9.4，且供试品的等电点图谱应与对照品的一致（通则0541第六法）。
　　3.1.7  紫外光谱
　　用水或0.85%～0.90%氯化钠溶液将供试品稀释至100～500μg/ml，在光路1cm、波长230～360nm下进行扫描，最大吸收峰波长应为280nm±3nm（通则0401）。
　　3.1.8  细菌内毒素检查
　　依法检查（通则1143），每1支应小于10EU。
　　3.1.9  磷酸三丁酯残留量
　　如工艺中采用磷酸三丁酯，则每1ml中磷酸三丁酯应不大于10μg（通则3205）。
　　3.1.10  聚山梨酯80残留量
　　如工艺中釆用聚山梨酯80，则每1ml中聚山梨酯80应不大于100μg（通则3203）。
　　3.1.11  鼠源性病毒检查
　　依法检查（通则3303），至少每半年一次，应无任何特定的鼠源性病毒。
　　3.2  半成品检定
　　3.2.1  细菌内毒素检查
　　依法检查（通则1143），每1支应小于10EU。
　　3.2.2  无菌检查
　　依法检查（通则1101），应符合规定。
　　3.3  成品检定
　　除水分测定、装量差异检查、不溶性微粒检查、生物学活性、含量测定外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行其余各项检定。
　　3.3.1  鉴别试验
　　按免疫印迹法（通则3401）或免疫斑点法（通则3402）测定，应为阳性。
　　3.3.2  物理检查
　　3.3.2.1  外观
　　应为白色或类白色的疏松体或粉末，按标示量加入灭菌注射用水后迅速复溶为无色澄明液体。
　　3.3.2.2  可见异物
　　依法检查（通则0904），应符合规定。
　　3.3.2.3  不溶性微粒检查
　　依法检查（通则0903），应符合规定。
　　3.3.2.4  装量差异
　　依法检查（通则0102），应符合规定。
　　3.3.3  化学检定
　　3.3.3.1  水分
　　应不高于3.0%（通则0832第一法）。
　　3.3.3.2  pH值
　　应为6.0～7.4（通则0631）。
　　3.3.3.3  渗透压摩尔浓度
　　依法测定（通则0632），应符合批准的要求。
　　3.3.3.4  辛酸钠含量
　　如制品中加入辛酸钠，则每1支中辛酸钠应不大于0.1mmol（通则3111）。
　　3.3.4  生物学活性
　　依法测定，应不低于标示量（通则3530）。[3]
　　3.3.5  含量测定
　　采用ELISA或HPLC法，应为标示量的80%～120%。
　　酶联免疫吸附法按试剂盒说明书进行。
　　采用高效液相色谱法（通则0512）。
　　色谱条件：以适合分离分子质量为5～60kD蛋白质的色谱用凝胶为填充剂；以0.25mol/L磷酸盐缓冲液（含0.15mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L磷酸二氢钠溶液）-乙腈（85∶15）为流动相；检测波长为214nm。供试品溶液中鼠神经生长因子与人血白蛋白的分离度应符合要求。
　　测定法：取供试品和标准品适量，用流动相分别稀释制成每1ml中含鼠神经生长因子50μg的溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录30分钟。标准品溶液、供试品溶液均进样3次，记录色谱图并计算峰面积。按外标法以峰面积计算供试品中鼠神经生长因子的含量。
　　3.3.6  无菌检查
　　依法检查（通则1101），应符合规定。
　　3.3.7  细菌内毒素检查
　　依法检查（通则1143），每1支应小于10EU。
　　3.3.8  异常毒性检查
　　依法检查（通则1141小鼠试验法），应符合规定。
　　3.3.9  外源病毒污染检查
　　采用动物病毒敏感细胞（如BHK21，每瓶（25cm2）培养细胞中加入供试品1ml，37℃培养7天为一代，连续盲传3代，细胞应生长良好，不应出现病毒感染引起的病变，判为合格。
　　4  保存、运输及有效期
　　于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，按批准的有效期执行。
　　5  使用说明
　　应符合“生物制品分包装及贮运管理”规定和批准的内容。

• [1] 勘误为“小鼠应符合检定用清洁级动物相关要求（通则 3601）。” （2021-7-8发布）
• [2] 勘误为“每 1mg 蛋白质应不低于 4.0×10⁵U。” （2021-7-8发布）
• [3] 勘误为“ 应不低于标示量的 80%（通则 3530）。” （2021-7-8发布）