3517 人凝血因子Ⅱ效价测定法

3517 人凝血因子Ⅱ效价测定法
    （一期法）
    本法系用人凝血因子Ⅱ缺乏血浆为基质血浆，采用一期法测定供试品人凝血因子Ⅱ效价。
    试剂  （1）稀释液  称取巴比妥钠11.75g、氯化钠14.67g，溶于适量水中，用1mol/L盐酸溶液调pH值至7.3，再加水稀释至2000ml。临用前，加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%。
    （2）含钙促凝血酶原激酶（Thromboplastin）。
    （3）人凝血因子Ⅱ缺乏血浆  人凝血因子Ⅱ含量低于1%的人血浆或人工基质血浆。
    人凝血因子Ⅱ标准品溶液的制备  用人凝血因子Ⅱ缺乏血浆或生理氯化钠溶液将标准品稀释成每1ml含1IU凝血因子Ⅱ，再用稀释液分别做10倍、20倍、40倍和80倍稀释，置冰浴备用。
    供试品溶液的制备  用人凝血因子Ⅱ缺乏血浆或生理氯化钠溶液将供试品稀释成每1ml约含1IU凝血因子Ⅱ，再用稀释液做10倍、20倍或40倍稀释，置冰浴待用。
    测定法  量取供试品溶液0.1ml，加入凝血因子Ⅱ缺乏血浆0.1ml，混匀，置37℃水浴中保温一定时间（一般3分钟），然后加入已预热至37℃的含钙促凝血酶原激酶溶液0.2ml，记录凝固时间。
    用不同稀释度的人凝血因子Ⅱ标准品溶液0.1ml替代供试品溶液，同法操作。
    以人凝血因子Ⅱ标准品溶液效价（IU/ml）的对数对其相应的凝固时间（秒）的对数作直线回归，求得直线回归方程，计算供试品溶液人凝血因子Ⅱ效价，再乘以稀释倍数，即为供试品人凝血因子Ⅱ效价（IU/ml）。
    【附注】（1）直线回归相关系数应不低于0.98。
    （2）测定时要求每个稀释度平行测定2管，2管之差不得超过均值10%，否则重测。
    （3）直接与标准品、供试品和血浆接触的器皿应为塑料制品或硅化玻璃制品。
    （4）采用全自动凝血仪操作，按仪器使用说明书进行。