1213 硫酸鱼精蛋白生物测定法

1213 硫酸鱼精蛋白生物测定法
    本法系测定硫酸鱼精蛋白供试品（T）中和肝素标准品（S）所致延长新鲜兔血或猪、兔血浆凝结时间的程度，以测定供试品效价的方法。
    肝素标准品溶液的制备 精密称取肝素标准品适量，按标示效价加0.9％氯化钠溶液溶解使成几种不同浓度的溶液，相邻两种浓度每1ml中所含肝素效价（单位）相差应相等，且不超过5个单位，一般可配成每1ml中含85单位、90单位、95单位、100单位、105单位、110单位、115单位、120单位、125单位等的溶液。
    供试品溶液的制备 供试品如为粉末，精密称取适量，按干燥品计算，加0.9％氯化钠溶液溶解使成每1ml中含1mg的溶液。供试品如为注射液，则按标示量加0.9％氯化钠溶液稀释至同样浓度。
    血浆的制备 同肝素生物测定法 中血浆制备法制备（通则1208）。
    测定法 取管径均匀（0.8cm×3.8cm）、清洁干燥的小试管8支，第1管和第8管为空白对照管，加入0.9％氯化钠溶液0.2ml，第2～7管为供试品管，每管均加入供试品溶液0.1ml，再每管分别加入上述一种浓度的肝素标准品稀释液0.1ml，立即混匀。取刚抽出的兔血适量，分别加入上述8支试管内，每管0.8ml，立即混匀，避免产生气泡，并开始计算时间，将小试管置37℃±0.5℃恒温水浴中，从采动物血时起至小试管放入恒温水浴的时间不得超过2分钟；如用血浆，则分别于上述各管中加入0.7ml的血浆，置37℃±0.5℃恒温水浴中预热5～10分钟，每管分别加入1％氯化钙溶液0.1ml，立即混匀，避免产生气泡，并开始计算时间。观察并记录各管凝结时间。
    结果判断 两支对照管的凝结时间相差不得超过1.35倍。在供试品管的凝结时间不超过两支对照管平均凝结时间150％的各管中，以肝素浓度最高的一管作为终点管。
    同样重复5次，5次试验测得终点管的肝素浓度，相差不得大于10个单位。5次结果的平均值，即为硫酸鱼精蛋白供试品（干燥品）1mg中和肝素的效价（单位）。