大豆磷脂（供注射用）

大豆磷脂（供注射用）Dadou Linzhi（Gongzhusheyong）Soya Lecithin（For Injection）
    [8030-76-0]
    大豆磷脂系从大豆中提取精制而得的磷脂混合物。以无水物计算，含磷量应不得少于2.7%；含氮量应为1.5%～2.0%；含磷脂酰胆碱应不得少于45.0%，含磷脂酰乙醇胺应不得过30.0%，含磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺总量不得少于70%。
    【性状】本品为黄色至棕色的半固体、块状体。
    本品在乙醚和乙醇中易溶，在丙酮中不溶。
    酸值  本品的酸值应不大于30（通则0713）。
    碘值  本品的碘值应不小于75（通则0713）。
    过氧化值  本品的过氧化值应不大于3.0（通则0713）。
    【鉴别】（1）取本品约10mg，加乙醇溶液2ml，加5%氯化镉乙醇溶液1～2滴，即产生白色沉淀。
    （2）取本品0.4g，加乙醇溶液2ml，加硝酸铋钾溶液（取硝酸铋8g，加硝酸20ml使溶解；另取碘化钾27.2g，加水50ml使溶解，合并上述两种溶液，加水稀释成100ml）1～2滴，即产生砖红色沉淀。
    （3）在含量测定项下磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
    【检查】溶液的颜色  取本品适量，加乙醇制成每1ml中含6mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在350nm处的波长处测定吸光度，不得过0.8。
    丙酮不溶物  取本品1.0g，精密称定，加丙酮约15ml，搅拌使其溶解后，用G4垂熔玻璃坩埚滤过，残渣用丙酮洗涤，洗至丙酮几乎无色。残渣在105℃干燥至恒重，不溶物不得少于90.0%，
    己烷中不溶物  取本品l0.0g，精密称定，加正己烷100ml，振摇使样品溶解，用事先在105℃干燥1小时并称重的G4垂熔玻璃坩埚滤过，锥形瓶用25ml正己烷洗涤两次，洗液过滤后，G4垂熔玻璃坩埚于105℃干燥1小时并称重，不溶物不得过0.3%。
    水分  取本品适量，照水分测定法（通则0832第一法）测定，含水分不得过1.5%。
    蛋白质  取本品1.0g，加正己烷10ml，微温使溶解，溶液应澄明，如有不溶物，以3000转/分钟的速度离心5分钟，弃去上清液，残留物加正己烷5ml，搅拌使溶解，同法操作2次，残留物经减压干燥除去正己烷后，加水1ml，振摇使溶解，加缩二脲试液（取硫酸铜1.5g和酒石酸钾钠6.0g，加水500ml使溶解，边搅拌边加入10%氢氧化钠溶液300ml，用水稀释至1000ml，混匀）4ml，放置30分钟，溶液应不呈蓝紫色或红紫色。
    重金属  取本品1.0g，依法检查（通则0821第二法），含重金属不得过百万分之五。
    砷盐  取本品1.0g置于100ml标准磨口锥形瓶中，加入5ml硫酸，加热至样品炭化，滴加浓过氧化氢溶液，至反应停止后继续加热，滴加浓过氧化氢溶液至溶液无色，冷却后加水10ml，蒸发至浓烟消失，依法检查（通则0822第二法），应符合规定（0.0002%）。
    铅  取本品0.1g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5～10ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解炉内，进行消解。消解完全后，取消解罐置电热板上缓缓加热至棕红色蒸气挥尽并近干，用0.2%硝酸转移至10ml容量瓶中，并用0.2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。同法制备试剂空白溶液；另取铅单元素标准溶液适量，用0.2%硝酸稀释制成每1ml含铅0～100ng的对照品溶液。取供试品和对照品溶液，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（通则0406第一法），在283.3nm的波长处测定，含铅不得过百万分之二。
    残留溶剂  取本品0.2g，精密称定，置20ml顶空瓶中，加水2ml，密封，作为供试品溶液。精密称取乙醇、丙酮、乙醚、石油醚、正己烷适量，加水溶解并稀释制成每1ml分别含上述溶剂约200µg、200µg、200µg、50µg、27µg的溶液，作为溶液。照残留溶剂测定法（通则0861）试验。毛细管柱HP-PLOT/Q，0.53mm×30m×40µm），火焰离子检测器（FID）；进样口温度为250℃，检测器温度260℃；柱温采用程序升温，初温为160℃维持8分钟，以每分钟5℃的升温速率升温至190℃，维持6分钟；分流比20：1。氮气流速：2ml/min。顶空温度80℃，顶空时间45分钟，进样体积为1ml。各色谱峰之间的分离度应符合要求。按外标法以峰面积计算，本品含乙醇、丙酮、乙醚均不得过0.2%，含石油醚不得过0.05%，含正己烷不得过0.02%，总残留溶剂不得过0.5%。
    有关物质  取本品约125mg，精密称定，置25ml量瓶中，用三氯甲烷-甲醇（2：1）溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试溶液。取溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇对照品各适量，用三氯甲烷-甲醇（2：1）溶解制成每1ml含溶血磷脂酰乙醇胺分别为10µg、20µg、40µg、60µg、80µg、100µg，含溶血磷脂酰胆碱分别为50µg、100µg、200µg、300µg、400µg、500µg的溶液，含磷脂酰肌醇分别为5µg、10µg、15µg，20µg、30µg、40µg的溶液作为对照品溶液。照磷脂酰胆碱含量含量测定方法，取各对照溶液20µl注入液相色谱仪，以浓度的对数值为横坐标，峰面积的对数值为纵坐标计算回归方程。取供试溶液20µl注入液相色谱仪，记录峰面积，由回归方程计算溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇的含量。含溶血磷脂酰乙醇胺不得过1%，含溶血磷脂酰胆碱不得过3.5%，含溶血磷脂酰乙醇胺和溶血磷脂酰胆碱总量不得过4.0%，含磷脂酰肌醇应不得过5.0%，含总有关物质不得过8.0%。
    无菌（供无除菌工艺的无菌制剂用）  取本品，依法检查（通则1101），应符合规定。
    微生物限度  取本品，依法检查（通则1105与通则1106），每1g供试品中除细菌、霉菌及酵母菌数不得过100cfu[3]，还不得检出大肠埃希菌和沙门菌[1]。
    细菌内毒素	取本品，以无水乙醇充分溶解，进一步使用细菌内毒素检查用水稀释至实验所需浓度（该溶液中乙醇浓度应小于20%），依法检查（通则1143），每1g大豆磷脂中含内毒素的量应小于2.0EU。
    【含量测定】磷含量  对照品溶液的制备  精密称取经105℃干燥至恒重的磷酸二氢钾对照品0.0439g，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置另一50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀（每1ml相当于0.04mg的磷）。
    供试品溶液的制备  取本品约0.15g，精密称定，置凯氏烧瓶中，加硫酸20ml与硝酸50ml，缓缓加热至溶液呈淡黄色，小心滴加过氧化氢溶液，使溶液褪色，继续加热30分钟，冷却后，转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
    测定法  精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置50ml量瓶中，各依次加入钼酸铵硫酸试液4ml，亚硫酸钠试液2ml与新鲜配制的对苯二酚溶液（取对苯二酚0.5g，加水适量使溶解，加硫酸1滴，加水稀释成100ml）2ml，加水稀释至刻度，摇匀，暗处放置40分钟，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在620nm的波长处分别测定吸光度，计算含磷量。
    氮含量  取本品0.1g，精密称定，照氮测定法（通则0704第二法）测定，计算。
    磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺含量  照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适应性试验  用硅胶为填充剂（色谱柱Alltima Sillica，250mm×4.6mm×5µm），柱温为40℃；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（85：15：0.45：0.05，V/V）为流动相A，以正己烷-异丙醇-流动相A（20：48：32，V/V）为流动相B；流速为每分钟1ml；按下表进行梯度洗脱；检测器为蒸发光散射检测器（参考条件：漂移管温度为72℃；载气流量为每分钟2.0ml）。
    -------------------------------------------------------
    时间（分钟）	流动相A（%）	流动相B（%）
    -------------------------------------------------------
    0		10		90
    20		30		70
    35		95		5
    36		10		90
    41		10		90
    -------------------------------------------------------
    取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱对照品各适量，用三氯甲烷-甲醇（2：1）溶解，制成每1ml含上述对照品分别为50µg、100µg、100µg、200µg、200µg、200µg的混合溶液[2]，取上述溶液20µl注入液相色谱仪，各成分按上述顺序依次洗脱，各成分分离度应符合规定，理论板数按磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺峰、磷脂酰肌醇计算应不低于1500。
    测定法  分别称取磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱对照品适量，精密称定，用三氯甲烷-甲醇（2：1）溶解，稀释制成每1ml含磷脂酰胆碱分别为50µg、100µg、150µg、200µg、300µg、400µg，含磷脂酰乙醇胺分别为5µg、10µg、15µg、20µg、30µg、40µg的溶液作为对照品溶液。精密量取上述对照品溶液各20µl注入液相色谱仪中，记录色谱图，以对照品溶液浓度的对数值与相应的峰面积对数值计算回归方程，另精密称取本品约15mg，置50ml量瓶中，加三氯甲烷-甲醇（2：1）溶解并稀释至刻度。取供试溶液20µg注入液相色谱仪中，记录色谱图，由回归方程计算磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺的含量。
    【类别】药用辅料，乳化剂，增溶剂等。
    【贮藏】密封、避光，低温（-18℃以下）保存。