丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）

丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）Bingxing Ganyan Bingdu Kangti Zhenduan Shijihe（Meilianmianyifa）Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis C Virus（ELISA）
    本品系用丙型肝炎病毒（HCV）抗原包被的微孔板和酶标记抗人IgG及其他试剂制成，应用间接酶联免疫法原理检测人血清或血浆样品中的HCV抗体。
    1基本要求
    生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
    2制造
    2.1专用原材料
    2.1.1HCV抗原
    选用重组蛋白抗原或人工合成肽抗原，应包括结构区和非结构区。抗原的分子量、活性、纯度应符合要求。
    2.1.2抗人IgG
    可使用抗人IgG单克隆抗体或多克隆抗体。抗体的纯度、活性应符合要求。
    2.1.3辣根过氧化物酶（或其他适宜标记的酶）
    辣根过氧化物酶的RZ值应不低于3.0，其他标记用酶应符合相应的要求。
    2.1.4阳性对照用血清或血浆
    HCV抗体检测为阳性的人血清或血浆。
    2.1.5阴性对照用血清或血浆
    HCV抗体检测为阴性的人血清或血浆。
    2.1.6微孔板
    CV（%）应不高于10%。
    2.2制备程序
    2.2.1包被抗原的纯化
    采用适宜的方法纯化抗原，纯化后抗原的分子量、纯度、活性应符合要求。纯化后的抗原于低温下保存。
    2.2.2抗人IgG的纯化
    采用适宜的方法纯化抗体，纯化后抗体的纯度、活性应符合要求。纯化后的抗体于低温下保存。
    2.2.3酶标记抗体的制备
    抗体纯化及检定方法同2.2.2项，采用常规过碘酸钠-乙二醇或其他适宜方法进行辣根过氧化物酶或其他酶标记，酶标记抗体应符合3.1.1~3.1.4项和3.1.7项要求，加入适当的保护剂后于低温下保存。
    2.2.4包被抗原浓度和酶标记抗体浓度的选定
    采用方阵滴定法选择最佳包被抗原浓度和酶标记抗体的工作浓度。
    2.2.5包被抗原板的制备
    采用最佳包被浓度的抗原包被微孔板孔，经封闭、干燥和密封等处理后，于2~8℃保存。对包被抗原板须抽样进行检定，应符合3.1.1~3.1.4项和3.1.7项要求。
    2.2.6阳性对照
    选用HCV抗体检测为阳性的5份以上人血清或血浆混合，经60℃、1小时处理，除菌过滤，于2~8℃保存。
    2.2.7阴性对照
    选用HCV抗体检测为阴性的5份以上人血清或血浆混合，经60℃、1小时处理，除菌过滤，于2~8℃保存。
    2.2.8反应时间的设置
    检测过程中加入检测样本后反应时间应不低于60分钟，加入酶结合物后反应时间应不低于30分钟，加入显色液后显色时间应不低于30分钟。
    2.3半成品检定
    按3.1项进行。
    2.4成品
    2.41分批
    应符合“生物制品分批规程”规定。
    2.4.2分装与冻干
    应符合“生物制品分装和冻干规程”，分装或冻干后保存于2~8℃。
    2.4.3规格
    应为经批准的规格。
    2.4.4包装
    应符合“生物制品包装规程”规定。
    3检定
    3.1半成品检定
    3.1.1阴性参考品符合率
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
    3.1.2阳性参考品符合率
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
    3.1.3最低检出限
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
    3.1.4精密性
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，CV（%）应不大于15%（n=10）。
    3.1.5无菌检查
    依法检查（通则1101）含有蛋白质成分的液体组分，半成品加防腐剂分装后，对留样进行无菌检查，采用直接接种法，应符合规定。
    3.1.6水分
    冻干组分水分应不高于3.0%（通则0832）。
    3.1.7稳定性试验
    试剂各组分于37℃放置至少3天（有效期为6个月），应符合3.1.1~3.1.4项要求。
    3.2成品检定
    3.2.1物理检查
    3.2.1.1外观
    液体组分应澄清；冻干组分应呈白色或棕色疏松体。
    3.2.1.2溶解时间
    冻干组分应在3分钟内溶解。
    3.2.2阴性参考品符合率
    按3.1.1项进行。
    3.2.3阳性参考品符合率
    按3.1.2项进行。
    3.2.4最低检出限
    按3.1.3项进行。
    3.2.5精密性
    按3.1.4项进行。
    3.2.6稳定性试验
    出厂前进行，方法按3.1.7项进行。
    4保存及有效期
    于2~8℃避光保存。自包装之日起，按批准的有效期执行。
    5使用说明
    应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。