乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）

乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）Yixing Ganyan Bingdu Biaomian Kangyuan Zhenduan Shijihe（Meilianmianytfa）Diagnostic Kit for Hepatitis B Virus Surface Antigen （ELISA）
    本品系用乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）包被的微孔板和酶标记抗-HBs及其他试剂制成，应用双抗体夹心酶联免疫法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）。
    1基本要求
    生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
    2制造
    2.1专用原材料
    2.1.1抗-HBs
    可使用HBsAg多克隆抗体或单克隆抗体，抗体的活性、纯度应符合要求。
    2.1.2辣根过氧化物酶（或其他适宜标记的酶）
    辣根过氧化物酶的RZ值应不低于3.0，其他标记用酶应符合相应的要求。
    2.1.3阳性对照用血清或血浆
    HBsAg检测为阳性的人血清或血浆。
    2.1.4阴性对照用血清或血浆
    HBsAg检测为阴性的人血清或血浆。
    2.1.5微孔板
    CV（%）应不高于10%。
    2.2制备程序
    2.2.1包被抗体的纯化
    采用盐析法、离子交换色谱法纯化，亦可采用其他适宜的纯化方法。抗体纯度用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法或其他方法测定，纯化后抗体的活性、纯度应符合要求，于低温下保存。
    2.2.2酶标记抗体的制备
    抗体纯化及鉴定方法同2.2.1项，采用常规过碘酸钠-乙二醇法或其他适宜方法进行辣根过氧化物酶或其他酶标记，酶标记抗体的活性、纯度应符合要求，加入适当保护剂后于低温下保存。
    2.2.3包被抗体浓度和酶标记抗体浓度的选定
    采用方阵滴定法选择最佳包被抗体浓度和酶标记抗体的工作浓度。
    2.2.4包被抗体板的制备
    采用最佳包被浓度的抗体包被微孔板孔，经封闭、干燥和密封等处理后，于2~8℃保存。对包被板须抽样检定，应符合3.1.1~3.1.4项和3.1.7项要求。
    2.2.5阳性对照
    选用HBsAg为阳性的人血清或血浆，经60℃、1小时处理后.，除菌过滤，于2~8℃保存；也可采用重组蛋白抗原配制。
    2.2.6阴性对照
    选用HBsAg为阴性的5份以上人血清或血浆混合，经60℃、1小时处理后，除菌过滤，于2~8℃保存。
    2.2.7反应时间的设置
    检测过程中加入检测样本后反应时间应不低于60分钟，加入酶结合物后反应时间应不低于30分钟，加入显色液后显色时间应不低于30分钟。
    2.3半成品检定
    按3.1项进行。
    2.4成品
    2.4.1分批
    应符合“生物制品分批规程”规定。
    2.4.2分装与冻干
    应符合“生物制品分装和冻干规程”规定，分装或冻干后保存于2~8℃。
    2.4.3规格
    应为经批准的规格。
    2.4.4包装
    应符合“生物制品包装规程”规定。
    3检定
    3.1半成品检定
    3.1.1阴性参考品符合率
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，不得出现假阳性。
    3.1.2阳性参考品符合率
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，检测3份浓度值大于5×10^4 IU/ml的HBsAg阳性参考品，不得出现假阴性。
    3.1.3最低检出量
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，HBsAg adr、adw及ay亚型的最低检出量应符合要求。
    3.1.4精密性
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，CV（%）应不高于15%（n=10）。
    3.1.5无菌检查
    依法检查（通则1101）含有蛋白质成分的液体组分，半成品加防腐剂分装后，对留样进行无菌脸查，采用直接接种法，应符合规定。
    3.1.6水分
    冻干组分水分应不高于3.0%（通则0832）。
    3.1.7稳定性试验
    试剂各组分于37℃放置至少3天（有效期为6个月），应符合3.1.1~3.1.4项要求。
    3.2成品检定
    3.2.1物理检查
    3.2.1.1外观
    液体组分应澄清透明；冻干组分应呈白色或棕色疏松体。
    3.2.1.2溶解时间
    冻干组分应在3分钟内溶解。
    3.2.2阴性参考品符合率
    按3.1.1项进行。
    3.2.2阳性参考品符合率
    按3.1.2项进行。
    3.2.4最低检出量
    按3.1.3项进行。
    3.2.5精密性
    按3.1.4项进行。
    3.2.5稳定性试验
    出厂前进行，方法按3.1.7项进行。
    4保存及有效期
    于2~8℃避光保存。自包装之日起，按批准的有效期执行。
    5使用说明
    应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。