冻干抗五步蛇毒血清

冻干抗五步蛇毒血清Donggan Kangwubushedu XueqingAgkistrodon acutus Antivenin，Freeze-dried
      本品系由五步蛇毒或脱毒五步蛇毒免疫马所得的血浆，经胃酶消化后纯化制成的冻干抗五步蛇毒球蛋白制剂。用于治疗被五步蛇咬伤者。
      1基本要求
      生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
      2制造
      2.1抗原与佐剂
      应符合“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定。
      2.2免疫动物及血浆
      2.2.1免疫动物
      免疫用马匹必须符合“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定。
      2.2.2采血与分离血浆
      按“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定进行。用动物法或其他适宜的方法测定免疫血清效价，达到60U/ml时，即可采血、分离血浆，加适宜防腐剂，并应做无菌检查（通则1101）。
      2.3胃酶
      用生理氯化钠溶液将胃酶配制成1mg/ml溶液，进行类A血型物质含量测定（通则3415），应不高于1.0μg/ml。
      2.4原液
      2.4.1原料血浆
      原料血浆的效价（通则3511）应不低于50U/ml。 血浆在保存期间，如发现有明显的溶血、染菌及其他异常现象，不得用于制备。
      2.4.2制备
      2.4.2.1消化
      将免疫血浆稀释后，加入适量胃酶，如果必要还可加入适量甲苯，调整适宜pH值后，在适宜温度下消化一定时间。
      2.4.2.2纯化
      采用加温、硫酸铵盐析、明矾吸附等步骤进行纯化。
      2.4.2.3浓缩、澄清及除菌过滤
      浓缩可釆用超滤或硫酸铵沉淀法进行。可加入适量硫柳汞或间甲酚作为防腐剂，然后澄清、除菌过滤。
      纯化后的抗血清原液应置2～8℃避光保存至少1个月作为稳定期。
      2.4.3原液检定
      按3.1项进行。
      2.5半成品
      2.5.1配制
      将检定合格的原液，按成品规格以灭菌注射用水稀释，调整效价、蛋白质浓度、pH值及氯化钠含量，除菌过滤。
      2.5.2半成品检定
      按3.2项进行。
      2.6成品
      2.6.1分批
      应符合“生物制品分批规程”规定。
      2.6.2分装及冻干
      应符合“生物制品分装和冻干规程”及通则0102有关规定。在冻干过程中制品温度应不高于35℃，真空或充氮封口。
      2.6.3规格
      复溶后每瓶10ml，含抗五步蛇毒血清2000U。
      2.6.4包装
      应符合“生物制品包装规程”及通则0102有关规定。
      3检定
      3.1原液检定
      3.1.1抗体效价
      依法测定（通则3511）。
      3.1.2无菌检查
      依法检查（通则1101），应符合规定。
      3.1.3热原检查
      依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每1kg注射3.0ml。
      3.2半成品检定
      无菌检查
      依法检查（通则1101），应符合规定。
      3.3成品检定
      除水分测定、装量差异检查外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行以下检定。
      3.3.1鉴别试验
      每批成品至少抽取1瓶做以下鉴别试验。
      3.3.1.1动物中和试验或特异沉淀反应
      按通则3511进行，供试品应能中和五步蛇毒；或采用免疫双扩散法（通则3403），应与五步蛇毒产生特异沉淀线。
      3.3.1.2免疫双扩散或酶联免疫吸附试验
      采用免疫双扩散法（通则3403）进行，供试品仅与抗马的血清产生沉淀线；或采用酶联免疫法（通则3418），供试品应与马IgG抗体反应呈阳性。
      3.3.2物理检查
      3.3.2.1外观
      应为白色或淡黄色的疏松体，按标示量加入注射用水，轻摇后应于15分钟内完全溶解为无色或淡黄色的澄明液体，无异物。
      3.3.2.2渗透压摩尔浓度
      应符合批准的要求（通则0632）。
      3.3.2.3装量差异
      依法检查（通则0102），应符合规定。
      3.3.3化学检定
      3.3.3.1水分
      应不高于3.0%（通则0832）。
      3.3.3.2pH值
      应为6.0～7.0（通则0631）。
      3.3.3.3蛋白质含量
      应不高于170g/L（通则0731第一法）。
      3.3.3.4氯化钠含量
      应为7.5～9.5g/L（通则 3107）。
      3.3.3.5硫酸铵含量
      应不高于1.0g/L（通则3104）。
      3.3.3.6防腐剂含量
      如加硫柳汞，含量应不高于0.1g/L（通则3115）；如加间甲酚，含量应不高于2.5g/L（通则3114）。
      3.3.3.7甲苯残留量
      生产工艺中如添加甲苯，需检测甲苯残留量，应不高于0.089%（通则0861）。
      3.3.4纯度
      3.3.4.1白蛋白检查
      将供试品稀释至2%的蛋白质浓度，进行琼脂糖凝胶电泳分析（通则0541第三法），应不含或仅含痕量白蛋白迁移率的蛋白质成分。
      3.3.4.2F（ab'）2含量
      采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定（通则0541第五法），上样量约25μg，F（ab'）2含量应不低于60%，IgG含量应不高于10%。
      3.3.5抗体效价
      抗五步蛇毒血清效价应不低于180U/ml（通则3511）。每瓶抗五步蛇毒血清装量应不低于标示量。
      3.3.6无菌检查
      依法检查（通则1101），应符合规定。
      3.3.7热原检查
      依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每1kg注射3.0ml。
      3.3.8异常毒性检查
      依法检查（通则1141），应符合规定。
      4稀释剂
      稀释剂为灭菌注射用水，稀释剂的生产应符合批准的要求。
      灭菌注射用水应符合本版药典（二部）的相关规定。
      5保存、运输及有效期
      于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为60个月。
      6使用说明
      应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。