皮上划痕人用炭疽活疫苗

皮上划痕人用炭疽活疫苗Pishang Huahen Renyong Tanju HuoyimiaoAnthrax Vaccine (Live) for Percutaneous Scarification
    本品系用炭疽芽孢杆菌的弱毒菌株经培养、收集菌体后稀释制成的活菌悬液。用于预防炭疽。
    1 基本要求
    生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
    炭疽疫苗生产车间必须与其他生物制品生产车间及实验室分开。所需设备及器具均须单独设置并专用。
    2 制造
    2.1 菌种
    生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。
    2.1.1 名称及来源
    采用无荚膜、水肿型具有一定残余毒力的炭疽芽孢杆菌弱毒菌株 CMCC 63001（A16R）。
    2.1.2 种子批的建立
    应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。
    2.1.3 种子批的传代
    工作种子批菌种启开后至疫苗生产，传代应不超过3代。
    2.1.4 种子批的检定
    每3～5年应对菌种培养特性、残余毒力、特异性毒性及免疫力进行全面检定。生产前应检查菌形、培养特性及噬菌体特异性。
    2.1.4.1 培养特性
    在牛肉消化液琼脂或其他适宜固体培养基上生长，菌落为灰白色、不透明、呈卷发状。液体培养呈絮状发育，在血清培养基上不形成荚膜，无动力。
    2.1.4.2 染色镜检
    应为革兰氏阳性大杆菌，呈链状排列，可形成芽孢。
    2.1.4.3 生化反应
    能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，不分解水杨苷（通则 3605）。
    2.1.4.4 残余毒力试验
    用体重350～400g豚鼠5只，各皮下注射含菌5.0×107/ml的菌悬液1ml。另用体重18～20g小鼠5只，各皮下注射含菌5.0×107/ml的菌悬液0.1ml。观察10天，可有特异死亡，但脏器涂片应仅找到无荚膜的本菌。应有部分动物出现水肿，若全部动物不出现水肿，应复试，复试仍无水肿，菌种不得用于生产。
    2.1.4.5 特异性毒性试验
    用体重2.0～2.5kg家兔10只，各皮下注射含菌2.5×108/ml的菌悬液1ml，观察10天，在注射部位可出现水肿，全部动物应存活。如有死亡，应用同数量动物复试，复试仍有死亡，菌种不得用于生产。
    2.1.4.6 免疫力试验
    用体重2.0～2.5kg家兔10只，各皮下注射含菌 2.5×108ml的菌悬液1ml，于注射后18～20天，用炭疽毒菌攻击，各皮下注射20MLD。同时用同体重的家兔3只，各皮下注射1MLD毒菌作为对照。观察10天，对照动物应全部死亡，试验组保护率60%为合格。
    2.1.4.7 噬菌体特异性试验 
    用平皿法检查，接种菌液后，加入工作浓度的炭疽噬菌体1滴，置33～34℃培养后，在滴噬菌体处应无本菌生长。 
    2.1.5 种子批的保存 
    种子批应冻干保存于8℃以下。
    2.2 原液 
    2.2.1 生产用种子
    将工作种子批启开后，接种于牛肉消化液琼脂或其他适宜培养基，置33～34℃培养18～20小时，经检查为纯菌者，保存于2～8℃， 2周内使用。
    2.2.2 生产用培养基
    采用牛肉汁琼脂（pH7.2～7.4）或经批准的其他培养基。
    2.2.3 接种和培养
    将生产用种子移种于牛肉消化液中，置33～34℃培养18～24小时，检查其生长特性、菌形及纯度，应符合2.1.4.1～2.1.4.2项要求。
    经检查合格的种子培养物，接种于牛肉消化液琼脂，置33～34℃培养。成熟的典型芽孢应达80%以上，无杂菌者可采集。
    2.2.4 收获
    将培养物刮入50%甘油溶液内，振摇使成均匀悬液，即为收获液。每瓶取样做纯菌检查（通则1101），生长物做涂片镜检，应符合炭疽芽孢杆菌 CMCC 63001 （A16R） 株特征，不得有杂菌。合格者合并制成原液。收获液和原液置2～8℃保存。
    2.2.5 原液检定 
    按3.1项进行。
    2.3 半成品
    2.3.1 配制
    用灭菌的50%甘油溶液将原液稀释成每1ml含菌 4.0×109。
    2.3.2 半成品检定 
    按3.2项进行。
    2.4 成品 
    2.4.1 分批
    应符合“生物制品分批规程”规定。
    2.4.2 分装
    应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
    2.4.3 规格
    每瓶0.25ml （5次人用剂量）含菌1.0×109， 0.5ml （10次人用剂量）含菌2.0×109，1ml（20次人用剂量）含菌4.0×109。每1次人用剂量含活菌数应不低于 8.0×107。
    2.4.4 包装
    应符合“生物制品包装规程”规定。
    3 检定 
    3.1 原液检定
    3.1.1 纯菌检查
    按通则1101方法做纯菌检查，生长物做涂片镜检，应符合炭疽芽孢杆菌 CMCC 63001（A16R）株特征，不得有杂菌。
    3.1.2 浓度测定
    用国家药品检定机构分发的浓度测定用参考品，以分光光度法或其他方法测定原液浓度。
    3.2 半成品检定 
    纯菌检查
    按3.1.1项进行。
    3.3 成品检定
    3.3.1 鉴别试验
    按2.1.4.7项进行。
    3.3.2 物理检查
    3.3.2.1 外观
    应为灰白色均匀悬液，无摇不散的菌块及异物。
    3.3.2.2 装量
    依法检查（通则0102），应不低于标示量。
    3.3.3 纯菌检查
    3.3.3.1 按3.1.1项进行。
    3.3.3.2 噬菌体裂解试验
    开启一支待检疫苗，取疫苗菌液120μl与120μl炭疽噬菌体在1.5mlEP管中混合，接种2个营养琼脂培养基平皿，每个平皿接种100μl。用L型玻璃棒均匀涂抹后分别置20～25℃、30～35℃培养观察16～24小时，无杂菌生长判为合格。
    3.3.4 浓度测定
    用国家药品检定机构分发的浓度测定用参考品，以分光光度法测定浓度，应为每1ml含菌3.2×109～4.8×109。
    3.3.5 活菌数测定
    取本品3瓶，混匀并稀释至菌数为5.0×102ml，接种5个平皿，每个平皿接种0.1ml。均匀涂抹后置35～37℃培养24小时，每1次人用剂量含活菌数应不低于8.0×107。
    3.3.6 效力测定
    取每5批疫苗中的首批按2.1.4.6项进行效力测定。
    3.3.7 特异性毒性检查
    用体重2.0～2.5kg家兔5只，各皮下注射含菌2.5×108/ml的菌悬液1ml，观察10天，注射部位可有水肿，动物应全部存活。如有死亡，应用加倍量动物复试。如仍有死亡，判为不合格。
    4 保存、运输及有效期
    于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为24个月。
    5 使用说明
    应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。
    皮上划痕人用炭疽活疫苗使用说明
    【药品名称】
    通用名称：皮上划痕人用炭疽活疫苗
    英文名称：Anthrax Vaccine （Live） for Percutaneous Scarification
    汉语拼音：Pishang Huahen Renyong Tanju Huoyimiao
    【成分和性状】 本品系用炭疽芽孢杆菌的弱毒株经培养、收集菌体后稀释制成。为灰白色均匀悬液。
    有效成分：炭疽芽孢杆菌弱毒株活菌体。
    辅料：应列出全部批准的辅料成分。
    【接种对象】 炭疽常发地区人群，皮毛加工与制革工人、放牧员以及其他与牲畜密切接触者。
    【作用与用途】 接种本疫苗后，可使机体产生免疫应答。用于预防炭疽。
    【规格】 每瓶0.25ml（5次人用剂量）含菌1.0×109，0.5ml（10次人用剂量）含菌 2.0×109，1ml（20次人用剂量）含菌4.0×109。每1次人用剂量含活菌数应不低于8.0×107。
    【免疫程序和剂量】 （1）在上臂外侧三角肌附着处皮上划痕接种。用消毒注射器吸取疫苗，在接种部位滴2滴，间隔3～4cm，划痕时用手将皮肤绷紧，用消毒划痕针在每滴疫苗处作“井”字划痕，每条痕长约1～1.5cm。划破表皮以出现间断小血点为宜。
    （2）用同一划痕针反复涂压，使疫苗充分进入划痕处。接种后局部至少应裸露5～10分钟，然后用消毒干棉球擦净。
    （3）接种后24小时划痕部位无任何反应者应重新接种。
    【不良反应】
    常见不良反应：
    （1）接种后24小时内，在注射部位可出现疼痛和触痛，注射局部红肿浸润轻、中度反应，多数情况2～3天内自行消失。
    （2）接种疫苗后可出现一过性发热反应。其中大多数为轻度发热反应，持续1～2天后可自行缓解，一般不需处理；对于中度发热反应或发热时间超过48小时者，可给予对症处理。
    罕见不良反应：
    严重发热反应，应给予对症处理，以防高热惊厥。
    极罕见不良反应：
    淋巴结肿大，血管神经性水肿。
    【禁忌】  （1）已知对该疫苗的任何成分过敏者。
    （2）患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者。
    （3）免疫缺陷、免疫功能低下或正在接受免疫抑制治疗者。
    （4）妊娠期或6个月内的哺乳期妇女。
    【注意事项】  （1）本品仅供皮上划痕用，严禁注射！
    （2）以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癫痫史者、过敏体质者、6个月以上的哺乳期妇女。
    （3）疫苗瓶有裂纹、标签不清或失效者、疫苗复溶后外观异常者均不得使用。
    （4）疫苗开启后应立即使用，如需放置，应置2～8℃于1小时内用完，剩余均应废弃。
    （5）应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用。接受注射者在注射后应在现场观察至少30分钟。
    （6）注射免疫球蛋白者，应至少间隔1个月以上接种本品，以免影响免疫效果。
    （7）开启疫苗瓶和接种时，切勿使消毒剂接触疫苗。
    （8）消毒皮肤只可用酒精，不可用碘酒，并在酒精挥发后再行接种。
    （9）本品与抗生素同时应用时可能影响疫苗的免疫效果。
    （10）本品为减毒活疫苗，不推荐在该疾病流行季节使用。
    （11）剩余疫苗、空疫苗瓶及用具，需用3%碱水煮沸消毒30分钟。
    （12）严禁冻结。	
    【贮藏】 于2～8℃避光保存和运输。
    【包装】 按批准的执行。
    【有效期】 24个月。
    【执行标准】
    【批准文号】
    【生产企业】
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