龟甲胶

龟甲胶GuijiajiaoTESTUDINIS CARAPACIS ET PLASTRI COLLA
    本品为龟甲经水煎煮、浓缩制成的固体胶。
    【制法】  将龟甲漂泡洗净，分次水煎，滤过，合并滤液（或加入白矾细粉少许），静置，滤取胶液，浓缩（可加适量的黄酒、冰糖及豆油）至稠膏状，冷凝，切块，晾干，即得。
    【性状】  本品呈长方形或方形的扁块或丁状。深褐色。质硬而脆，断面光亮，对光照视时呈半透明状。气微腥，味淡。
    【鉴别】（1）取本品粉末2g，加水10ml使溶解，滤过，滤液照下述方法试验：
    ①取滤液1ml，加茚三酮试液0.5ml，置水浴上加热15分钟，溶液显蓝紫色。
    ②取滤液1ml，加新制的1%硫酸铜溶液和40%氢氧化钠溶液（1：1）混合溶液数滴，振摇，溶液显紫红色。
    （2）取本品粉末0.1g，加1%碳酸氢铵溶液50ml，超声处理30分钟，用微孔滤膜滤过，取续滤液IOOμl，置微量进样瓶中，加胰蛋白酶溶液10μl（取序列分析用胰蛋白酶，加1%碳酸氢铵溶液制成每1ml中含1mg的溶液，临用时配制），摇匀，37℃恒温酶解12小时，作为供试品溶液。另取龟甲胶对照药材0.1g，同法制成对照药材溶液。照高效液相色谱法-质谱法（通则0512和通则0431）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（色谱柱内径为2.1mm）；以乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.3ml。采用质谱检测器，电喷雾正离子模式（ESI+），进行多反应监测（MRM），选择质荷比（m/z）631.3 （双电荷）→546.4和631.3（双电荷）→921.4作为检测离子对。取龟甲胶对照药材溶液，进样5μl，按上述检测离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于3：1。
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    时间（分钟） 流动相A（%）   流动相B（%） 
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    0～25         5→20       95→80 
    25～40       20→50       80→50 
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    吸取供试品溶液5μl，注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定。以质荷比（m/z） 631.3 （双电荷）→546.4和m/z 631.3 （双电荷）→921.4离子对提取的供试品离子流色谱中，应同时呈现与对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。
    【检查】  水分  取本品1g，精密称定，加水2ml，加热溶解后，置水浴上蒸干，使厚度不超过2mm， 照水分测定法（通则0832第二法）测定，不得过15.0%。
    总灰分 不得过2.0%（通则2302）。
    水不溶物 取本品1.0g，精密称定，加水10ml加热溶解，将溶液移入已恒重的10ml离心管中，离心，去除管壁浮油，倾去上清液，沿管壁加入温水至刻度，离心，如法清洗3次，倾去上清液，离心管于105℃加热2小时，取出，置干燥器中冷却30分钟，精密称定，计算，即得。
    本品水不溶物不得过2.0%。
    重金属 取炽灼残渣（通则0841），依法检查（通则0821 第二法），不得过30mg/kg。
    其他 应符合胶剂项下有关的各项规定（通则0184）。
    【含量测定】  照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1mol/L醋酸钠溶液（用醋酸调节pH值至6.5）（7：93）为流动相A，以乙腈-水（4：1）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为254nm。柱温为43℃。理论板数按L-羟脯氨酸峰计算应不低于4000。
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     时间（分钟）   流动相A（%）   流动相B（%）  
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     0～11           100→93     0→7    
    11～13.9         93→88      7→12  
    13.9～14         88→85      12→15  
     14～29          85→66      15→34  
     29～30          66→0       34→100 
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    对照品溶液的制备 取L-羟脯氨酸对照品、甘氨酸对照品、丙氨酸对照品、L-脯氨酸对照品适量，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml含L-羟脯氨酸70μg、甘氨酸0.14mg、丙氨酸60μg、L-脯氨酸70μg的混合溶液，即得。
    供试品溶液的制备  取本品粗粉约0.25g，精密称定，置25ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液20ml，超声处理（功率 300W，频率40kHz）30分钟，放冷，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀。精密量取2ml，置5ml安瓿中，加盐酸2ml，150℃水解1小时，放冷，移至蒸发皿中，用水10ml分次洗涤，洗液并入蒸发皿中，蒸干，残渣0.1mol/L盐酸溶液溶解，转移至25ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，即得。
    精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各5ml，分别置25ml量瓶中，各加0.1mol/L异硫氰酸苯酯（PITC）的乙腈溶液2.5ml，1mol/L三乙胺的乙腈溶液2.5ml，摇匀，室温放置1小时后，加50%乙腈至刻度，摇匀。取10ml，加正己烷10ml，振摇，放置10分钟，取下层溶液，滤过，取续滤液，即得。
    测定法  分别精密吸取衍生化后的对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含L-羟脯氨酸不得少于5.4%、甘氨酸不得少于12.4%、丙氨酸不得少于5.2%、L-脯氨酸不得少于6.2%。	
    【性味与归经】  咸、甘，凉。归肝、肾、心经。
    【功能与主治】  滋阴，养血，止血。用于阴虚潮热，骨蒸盗汗，腰膝酸软，血虚萎黄，崩漏带下。
    【用法与用量】  3～9g，烊化兑服。
    【贮藏】  密闭。